De son vrai nom Balaskovich, Josiane Balalasko grandit dans le bistrot de son père d'origine yougoslave. Lorsque celui-ci décède, elle n'a que quatorze ans. Elle est alors élevée par sa grand-mère et sa mère qui possède une petite auberge. Jeune fille douée artistiquement, elle s'ennuie néanmoins fermement à l'école. Tentée par le dessin, puis l'écriture de nouvelles SF, elle opte finalement pour le théâtre après avoir suivi une amie dans un cours. Elle se forme auprès de Tania Balachova, puis remplace Valérie Mairesse dans la troupe du Splendid. Très indépendante, elle poursuit également une carrière en solo entre one man shows et écriture de scénarios.
Lors du tournage de L'Ex-femme de ma vie : "J'ai eu parfois des cas de conscience. Il fallait que je me fasse raser les sourcils et je ne voulais pas. Le maquilleur insistait, la comédienne refusait. Le metteur en scène a finalement tranché...! Je me suis baladée pendant deux mois et demi sans sourcils, ça me faisait une tête terrible. Parfois aussi, c'était difficile de me déplacer avec le costume de Marie-Pierre qui est assez lourd."